分光光度法是指应用分光光度计的分析方法,因其具有灵敏、准确、快速及选择性好等特点被广泛应用于实验室的元素分析,分光光度计的使用虽然简单,但是其原理及一些基础知识想必有许多小伙伴也是不了解的,今天小境整理了一部分分享给大家,希望能对你有所帮助。
1.波长准确度的检验:
分光光度计在使用过程中,由于机械振动、温度变化、灯丝变形、灯座松动或更换灯泡等原因,经常会出现刻度盘上的读数与实际通过溶液的波长不符合的现象,因而导致仪器灵明度降低,影响测定结果的精度,需要进行检验。
检验波长准确度最简单的方法是用干涉滤光片
2.透射比正确度的检验:
用透射比标准值分别为10 %、20 %、30 %左右的光谱中性滤光片
3.稳定度的检验:
在零点不受光的条件下,用零点调节器将仪器调至零点,观察3分钟读取透射比的变化,即为零点稳定性。在仪器测量范围两端向中间靠10nm处,调节零点后,盖上样品室盖(打开光门),使光电管受光,调节透射比为95%(数显仪器调至100%)测3分钟读取透射比的变化,为光电流稳定性。
4.光的检验:
可见分光计棱镜式仪器在420nm处,光栅式仪器在360nm处,紫外分光计在220nm处分别用符合规定的截止滤光片
1.为了防止光电管疲劳:
不测定时必须将比色皿暗箱盖打开,使光路切断,以延长光电管使用寿命。
2.比色皿的使用方法:
①拿比色皿时:
手指只能捏住比色皿的毛玻璃面,不要碰比色皿的透光面,以免沾污。
②清洗比色皿时:
一般先用水冲洗,再用蒸馏水洗净。如,比色皿被有机物沾污,可用盐酸-乙醇混合洗涤液(1:2)浸泡片刻,再用水冲洗。不能用碱溶液或氧化性强的洗涤液洗比色皿,以免损坏。也不能用毛刷清洗比色皿,以免损伤它的透光面。每次做完实验时,应立即洗净比色皿。
③比色皿外壁的水用擦镜纸或细软的吸水纸吸干:
以保护透光面。
④测定有色溶液吸光度时:
一定要用有色溶液洗比色皿内壁几次,以免改变有色溶液的浓度。另外,在测定一系列溶液的吸光度时,通常都按由稀到浓的顺序测定,以减小测量误差。
⑤在实际分析工作中:
通常根据溶液浓度的不同,选用液槽厚度不同的比色皿,使溶液的吸光度控制在0.2~0.7。
分光光度计是精密仪器,正确安装、使用和保养对保持仪器良好的性能和保证测试的准确度有重要作用。
1.对仪器工作环境的要求
分光光度计应安装在稳定的工作台上,(周围不应有强磁场, 以防电磁干扰),室内温度应保持在(10~30)℃。室内应干燥,相对湿度宜控制在<85 %,室内应无腐蚀性气体,光线不宜过强。
2.仪器保养和维护方法
(1)仪器工作电压一般为220V,允许±10 %的电压波动。为保持光源灯和检测系统的稳定性,在电源电压波动较大的实验室最好配备稳压器。
(2)为了延长光源使用寿命,在不用时不用开光源灯。如果光源灯亮度明显减弱或不稳定,应及时更换新灯。更换后要调节好灯丝位置,不要用手直接接触窗口或灯泡,避免油污沾附,若不小心接触过,要用无水乙醇擦拭。
(3)单色器
(4)必须正确使用吸收池,保护吸收池光学面。
(5)光电转换元件不能长时间曝光,应避免强光照射或受潮积尘。