HPLC分析仪器的普及和其在自动化程度的提高,自动进样模式取代了原来手动模式,它大大提高了工作效率,增强了分析的精度,消除了人为误差等优势,越来越多的实验室使用自动进样器。与此同时,自动进样器有时出现的故障往往会使人头疼。要弄清楚故障发生的原因,有效地解决它的故障,首先要从日常维护和保养着手!
· 自动进样器常规维护 ·
纯水清洗色谱系统能清除管路中残存的缓冲盐,甲醇清洗,防止系统滋生细菌和微生物堵塞管路,也可以洗去不溶于水的物质。
注:Rinse口螺帽和进样口衬筒及进样口螺帽若有盐析或附脏物,先用纯水,后异丙醇或甲醇放超声波超洗10分钟。洗去脏物后晾干装上。
· 自动进样器常见的故障和解决办法 ·
Fig1 a是基线不稳,鬼峰增多的图谱
Fig1 b是正常的图谱,同时是清洗干净后的图谱
原因:在排除了泵,流动相和检测器问题后,这种现象说明进样系统被污染了。
解决方法:用5%的高氯酸水溶液代替原来的自动进样器的清洗液,用针筒抽吸约100mL,在样品瓶中装入上述清洗液,用一根塑料阻尼管代替色谱柱,阻尼管出口处连废液,不接检测器。打开泵,设置一个常规流速。设置自动进样程序,进样量200μL,分析时间1分钟,连续20次。结束后把清洗液换成纯水,样品瓶中装纯水,依上述同样操作,(考虑到进样量较多,且重复次数多,准备5个装适量液体的样品瓶,放入样品盘中,设置自动进样程序,每个瓶连续抽4次,5个样品瓶合计抽20次,避免吸空)。
说明:5%的高氯酸水溶液能够有效地去除系统中的污垢,如若无高氯酸,可用甲醇,纯水大进样量多次清洗,也能起到同样的效果。
原因:进样口被堵,流动相无法进入色谱柱,渗漏出来,致使泵压下降。
解决方法:根据自动进样器常规维护,更换进样隔垫和Septumcutout(若没有备件,进样口密封圈和rinse口隔垫用纯水→甲醇超洗干净。)用擦镜纸沾纯水擦干净进样口和rinse口旁的盐析,再用甲醇擦洗。装上两个部件,打开机器调试,无渗漏,泵压正常即可。
1)计量泵不准;
2)六位阀磨损。
解决方法:
1)计量泵吸液准确性判断。在样品瓶中装入足量的纯水,擦干净外面的水分,用分析天平称量,记录读数W1,放入进样盘,设置进样程序,进样量100μL,连续十次,结束后滤纸擦干样品瓶表面的水分,置天平称量,得读数W2,W1-W2得的数值应为1mL纯水在相应温度的质量。若差别不大,则计量泵无碍。若计量泵有问题,有可能计量泵柱塞杆或密封圈有问题。
2)六位阀磨损。根据自动进样器说明书,拆下六位阀,观察是否三个口有磨损,若磨损严重,则更换新的六位阀,根据书上的操作,装配好,调试,重现性良好即可。
超净工作台发现问题以后,进入仪器诊断界面,把针头提起来,离开针座,去掉自动进样器模块的前盖,拆掉针座连接六通阀的螺钉,用力把针座取下,将针座倒接到液相泵上,流速设置为5ml/min加压,一般的堵塞物都能立刻就给冲洗下来,如果冲不下来可以将针座放到超声仪里超声,然后再接泵冲,或者干脆延长管路,边接泵冲边超声。
注意:千万不要往丝杠上随意抹润滑油,因为润滑油本身会加重灰尘的吸附。擦完以后重启仪器试一下,很多时候问题都能解决。至于更复杂的机械臂定位不准或者无法抓取小瓶等问题,最好由专门的工程师上门来做维修了。