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秦境知识丨你的液相色谱柱为啥容易损坏?原来是这些没做到位!

新的液相色谱柱拿来我们都要做些什么呢?小伙伴们是不是都会有这样的困惑?下面跟着小境看看要注意哪些:


01
流动相平衡
新柱子拿到,一般先用甲醇平衡30min,然后甲醇水(甲醇少,水占比大)平衡30-60min,然后用流动相平衡色谱柱。(具体情况可能会根据色谱柱不同有所区别,以上一般是使用最多的反相柱)
02
平衡注意
我们知道一般色谱柱保留在有机溶剂中,如果您的流动相是含盐的流动相,那么那么千万要注意,用有机溶剂和大比例水的流动相过度,再走含盐流动相。否则会造成盐结晶,堵塞色谱系统。
03
哪种样品需要用样品平衡色谱柱
大分量的样品,比如多肽,需要用样品平衡色谱柱。
04
样品平衡目的
是为了将硅胶填料表面具有非特异性吸附的位点饱和。
05
平衡方法
平衡方法就是进样品。由于一般此类问题的样品分子量都比较大,扩散速度慢,所需要的平衡时间也会比较长。进样时可以多进些针,也可以用浓度更高的样品进样。
06
怎样说明平衡完毕
当保留时间和峰面积可以稳定时。所以在我们初次使用一根柱子时,如果出现保留时间和峰面积不重复时,很有可能说明,你需要用样品平衡色谱柱哦!!
07
认真阅读说明书
新到的液相色谱柱,首先检查色谱柱的包装外观及开盒之后色谱柱的外观及随色谱柱的检测报告等文档,有明显损伤的,请立即联系供货方。

如果没有这些问题,请认真阅读使用说明书,上面详细的介绍了该款色谱柱,使用前需要做什么,如何保护色谱柱,色谱柱的使用与保存,常见问题的处理方法,还有色谱柱的质保。

使用中不可以超过这些范围限制,否则色谱柱很可能被损坏。